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乳腺癌細胞4TO7熒光素酶標記小鼠模型

健明迪檢測提供的乳腺癌細胞4TO7熒光素酶標記小鼠模型,討論與結論 66c14與4T1和4T07細胞模型比較,具有CMA,CNAS認證資質。
乳腺癌細胞4TO7熒光素酶標記小鼠模型
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討論與結論

66c14與4T1和4T07細胞模型比較。將Luc標記的4T1、66c14、4T07細胞對BALB/c小鼠乳腺原位接種4T1細胞乳腺原位移植瘤最大,66c14細胞瘤體次之,4T07細胞瘤體最小;接種后35 d,三株細胞乳腺原位移植瘤大小較一致。4T1和66c14原位移植瘤均可發生轉移,其中4T1細胞較66c14細胞轉移最為嚴重,而4T07細胞未見轉移。

生物安全性

該小動物模型飼養在清潔級動物中,微生物處于監控狀態,動物房有相應的保護措施,小鼠不會出現逃逸,不會對外界環境造成影響。

評價驗證

本模型將luc基因轉染到小鼠乳腺癌細胞4TO7中得到了高表達luciferase細胞株。將luc標記的小鼠乳腺癌細胞4TO7細胞經原位接種至BALB/C小鼠,用活體熒光成像系統連續觀察28天,每7天觀察一次。第7天能夠發現成瘤,并且腫瘤的體積與發光強度隨時間變大、增強。

此模型與常規模型相比具有以下優點:(1)無創傷性;(2)可多次重復在不同時間點檢測;(3)快速掃描成像(時間<5 min);(4)可以使實驗動物整體成像;(5)同一實驗動物體內獲得全部時間點的整體數據。

制備方法

1. 細胞:小鼠乳腺癌細胞4TO7來自ATCC;載體:構建chicken β-actin-luc-NEO載體。CAG啟動子由巨細胞病毒(thecytomegalovirus,CMV)早期增強子(earlyenhancer element)和雞β-肌動蛋白( chickenbeta-actin )啟動子組成,用于驅動基因在哺乳動物載體的高水平表達。

2. 細胞穩定轉染:采用脂質體2000轉染小鼠乳腺癌細胞4TO7細胞,轉染后24 h,用含有G418的培養液篩選細胞三周,獲得穩定表達luciferase的細胞株,選擇其中高表達的克隆株擴大培養。

3. 腫瘤細胞的植入及活體熒光成像:收集處于生長對數期的轉染細胞,稀釋至5×106/mL。取0.1 mL細胞懸液接種于BALB/c小鼠(5周齡,體重15-18 g)右側第二對乳腺脂肪墊內。1×106個細胞/只,接種后每隔一周,采用活體熒光影像系統攝像動態觀察腫瘤的生長和轉移情況。觀察前每只小鼠腹腔注射熒光素底物(1.5 mg/10 g),飽和三溴乙醇(0.18 mL/10 g)麻醉后放人活體熒光影像系統攝像,Slide Book 4.0軟件進行分析。

研究背景

女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的,乳腺癌(breast cancer)是發生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發生在女性,男性僅占1%。乳腺并不是維持人體生命活動的重要器官,原位乳腺癌并不致命;但由于乳腺癌細胞喪失了正常細胞的特性,細胞之間連接松散,容易脫落。癌細胞一旦脫落,游離的癌細胞可以隨血液或淋巴液播散全身,形成轉移,危及生命。目前乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。

早期乳腺癌往往不具備典型的癥狀和體征,不易引起重視,常通過體檢或乳腺癌篩查發現。乳腺腫塊、乳頭溢液、皮膚改變、乳頭、乳暈異常、腋窩淋巴結腫等為乳腺癌的典型體征。

4TO7小鼠乳腺癌細胞,和4T1,66c14細胞同來源于一BALB/cfC3H小鼠自發乳腺癌細胞株,但4TO7細胞具有高致瘤性,但自發轉移率低。

細胞接種動物為BALB/c小鼠,BALB/c 是白色變種實驗室用鼠,起源于小家鼠Mus musculus,廣泛用于免疫學、生理學的動物實驗

模型信息

中文名稱:乳腺癌細胞4TO7熒光素酶標記小鼠模型

英文名稱:4TO7-LUC

類型:乳腺癌動物模型

分級:NA

用途:用于乳腺癌(breast cancer)研究。

研制單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

保存單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

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